前言
光學(xué)顯微鏡作為生命科學(xué)研究中十分基礎(chǔ)也是核心的設(shè)備之一,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、材料科學(xué)、醫(yī)學(xué)研究等多個領(lǐng)域。選擇一臺適合實驗室需求的科研級顯微鏡不僅直接影響研究成果的質(zhì)量,也是實驗室資源合理配置的關(guān)鍵。
選擇科研級顯微鏡時,需綜合考慮研究需求、樣本特性、分辨率、預(yù)算與維護(hù)等多方面因素。以下是需要重點關(guān)注的關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)和實際應(yīng)用因素。
樣本特性
考慮樣本是否為活體、大小、厚度等特性;罴(xì)胞觀察需選擇倒置熒光顯微鏡和活細(xì)胞孵育裝置;大樣本和厚樣本則需要能夠自動掃描XYZ軸的顯微鏡。
成像模式
根據(jù)研究需求選擇合適的成像模式,如明場成像、熒光成像、共聚焦成像、相差成像等,不同模式提供不同的信息維度。
分辨率要求
根據(jù)研究對象的尺度和觀察的目的確定所需分辨率,如只看熒光表達(dá)情況,不需要太高的分辨率,但要看細(xì)胞器結(jié)構(gòu)則需要極高的分辨率。
預(yù)算與維護(hù)
光學(xué)顯微鏡雖然大體看起來差不多,但是模塊化的設(shè)備和一體機(jī)在后期維護(hù)上存在很大差異,一體機(jī)由于集成化高,后期用戶自己就可以維護(hù),無需廠家上門,能夠節(jié)省不少費(fèi)用,并且通常比較操作簡單,人員的培訓(xùn)也不復(fù)雜,大大節(jié)約了時間和管理成本。
下面我們通過幾個問題,來一起看看究竟如何選擇。
你的觀察樣本是什么
選擇顯微鏡時要考慮的首要因素就是樣本的特性,或者說是耗材特性,因為玻片和孔板的厚度是完全不一樣的,玻片通常經(jīng)過蓋玻片觀察,很薄,正置可以進(jìn)行觀察,而孔板、培養(yǎng)皿等培養(yǎng)的細(xì)胞樣本則只能通過倒置,即物鏡在樣本下方,才能提供足夠的空間和物鏡與樣本所需的接近度。

艾普拜正倒置一體系列顯微鏡完美解決不同樣本不同的觀察需求,正置與倒置自由切換,一臺滿足您實驗室95%的樣本觀察。

選擇適合你研究的成像模式
明確能夠解決你科研需求的觀察方式,如明場觀察、相差觀察、熒光觀察等,選擇合適的觀察方式,才能正確解決你的問題,獲取符合要求的圖像。

你在什么維度上進(jìn)行觀察
常規(guī)顯微鏡往往只在平面進(jìn)行單視野觀察,即XY維度手動觀察,但實際科研實驗中,由于物鏡的景深限制、切片的技術(shù)限制、細(xì)胞的大小、觀察的需求等多種因素,樣本往往存在厚度,這會導(dǎo)致我們在進(jìn)行常規(guī)觀察時模糊不清。

艾普拜Revolve Generation 2正倒置一體熒光顯微鏡,具備Z軸層掃功能,可以為您提供大景深圖像,解決因樣本不平或較厚導(dǎo)致的模糊不清,為您提供一張清晰圖像。
當(dāng)您想要獲取整個切片或者整個孔板的所有信息時,XY軸的電動化則必不可少,如果通過手動去拍,不僅拍攝復(fù)雜時間長,還會漏掉很多視野和信息。

艾普拜Revolution全自動多功能顯微鏡具備超高速XY電動載物臺,能夠快速拼接獲取整個樣本的圖像。
還有一個維度主要針對活體成像——時間維度T。當(dāng)然,對于活細(xì)胞的成像需要保證系統(tǒng)的穩(wěn)定性和細(xì)胞生長所需的環(huán)境。因此自動掃描、自動聚焦、活細(xì)胞孵育裝置都是必不可少的。

艾普拜Revolution和Confocal均可加裝活細(xì)胞孵育裝置,為活細(xì)胞長時間觀察提供細(xì)胞生長條件。
更高的分辨率和厚樣本3D信息
厚樣本成像對于寬場顯微鏡來說是一個挑戰(zhàn),因為整個樣本都會被照明激發(fā),觀察的目標(biāo)區(qū)域可能因為來自失焦面的額外光線的干擾。目前主流的解決方式為使用軟件算法進(jìn)行優(yōu)化,以及使用共聚焦顯微鏡進(jìn)行成像,前者為數(shù)字化提高分辨率,算法至關(guān)重要,但算法優(yōu)化的問題,會導(dǎo)致結(jié)果不一定準(zhǔn)確。而共聚焦顯微鏡通過共軛裝置,物理上隔絕非焦面雜光的干擾,使圖像更清晰。
另外,對于3D重構(gòu),焦平面雜光干擾會顯著降低Z軸的分辨率。所以,一臺便捷、清晰的激光轉(zhuǎn)盤共聚焦顯微鏡能夠又快又好的解決問題。

艾普拜激光轉(zhuǎn)盤共聚焦,高速、高清、操作簡單、低光毒性,對于活細(xì)胞成像、易淬滅樣本、厚樣本3D重構(gòu)具備極佳效果。
誰來使用顯微鏡
顯微鏡的使用范圍非常廣,且不均勻,尤其是高校等科研單位,經(jīng)常會有人員變動,學(xué)生一波接一波,所以需要經(jīng)常進(jìn)行操作培訓(xùn),不僅學(xué)生學(xué)習(xí)困難,很難調(diào)出理想圖像,對于管理的負(fù)責(zé)人來說也是非常麻煩的,甚至需要親自來操作,工作量非常大。而艾普拜系列顯微鏡,操作十分簡單,用戶僅需簡單培訓(xùn)即可自己進(jìn)行調(diào)節(jié)拍攝,無需專人進(jìn)行操作。