在小鼠相關(guān)細(xì)胞的流式研究中,我們經(jīng)常發(fā)現(xiàn)一些小鼠細(xì)胞采用了不同于人源細(xì)胞的標(biāo)志物抗體。為什么同樣類型的細(xì)胞,人源和小鼠源會采用不同的標(biāo)志物?甚至不同品系小鼠相同類型的細(xì)胞,都會采用不同的標(biāo)志物?接下來我們了解下都有哪些常見的小鼠特有標(biāo)志物,為什么要用這些標(biāo)志物。
01 B細(xì)胞
人源標(biāo)志物:CD19、CD20
小鼠源標(biāo)志物:CD19、B220 (CD45R)
這是最經(jīng)典的例子。在B細(xì)胞檢測中,人B細(xì)胞的核心是CD19和CD20,而人源細(xì)胞也不表達B220 (CD45R);在小鼠中,情況卻有所不同,雖然CD19依舊重要,但小鼠CD20僅在B細(xì)胞發(fā)育的較晚階段(從前B細(xì)胞晚期開始)才開始表達,這意味著它無法標(biāo)記早期的B祖細(xì)胞,會遺漏一部分B細(xì)胞群體,同時小鼠幾乎所有B細(xì)胞都高表達B220(CD45的一種剪接變體)故而成為小鼠B細(xì)胞最佳檢測標(biāo)志物。
(小鼠細(xì)胞采用B220+確認(rèn)B細(xì)胞,CD20+確認(rèn)B細(xì)胞發(fā)育的較晚階段)
02 NK細(xì)胞
人源標(biāo)志物:CD56 (NCAM)
小鼠源標(biāo)志物:NK1.1 (NKR-P1C) /NKp46 (NCR1)/ CD49b (DX5)
NK細(xì)胞檢測時,人源和小鼠源的定義性標(biāo)志有顯著不同。人NK細(xì)胞根據(jù)CD56表達密度分亞群(CD56bright/CD56dim),是人NK細(xì)胞分型的核心標(biāo)志物。小鼠無CD56同源物作為標(biāo)志,常用NK1.1(NKR-P1C,僅限 C57BL/6 等部分品系,BALB/c等品系缺失)、NKp46 (NCR1、CD335,所有品系小鼠以及人類中都保守的),或更通用的CD49b (DX5,幾乎所有品系成熟NK細(xì)胞都表達,但也表達于某些活化T細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等,同時不標(biāo)記組織駐留NK細(xì)胞(如肝NK))。
(小鼠NK細(xì)胞檢測采用NK1.1+ NKp46(CD335)+)
03 巨噬細(xì)胞
人源標(biāo)志物:CD68
小鼠源標(biāo)志物:F4/80、CD68
F4/80 是小鼠組織駐留巨噬細(xì)胞的標(biāo)志性分子,在所有經(jīng)典的組織駐留巨噬細(xì)胞上極高表達(如腹腔巨噬細(xì)胞、肝臟Kupffer細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、肺泡巨噬細(xì)胞等),F(xiàn)4/80與CD11b 結(jié)合 (CD11b+ F4/80hi)是鑒定和分選組織巨噬細(xì)胞的金標(biāo)準(zhǔn)。人源細(xì)胞缺少F4/80表達,因此巨噬細(xì)胞通常使用CD68標(biāo)記巨噬細(xì)胞,小鼠巨噬細(xì)胞亦可采用CD68標(biāo)記。
(小鼠巨噬細(xì)胞檢測采用F4/80+ CD11b+區(qū)分其他單核細(xì)胞)
04 其他類型
除以上類型的細(xì)胞外,還有其他類型細(xì)胞,在人源和小鼠源檢測流式標(biāo)志物時有差異,例如:
漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞:小鼠源通常檢測B220 (CD45R)、Siglec-H、PDCA-1 (BST2),人源通常檢測CD123 (IL-3Rα)、CD303 (BDCA-2)、CD304 (BDCA-4);
中性粒細(xì)胞:小鼠源通常檢測Ly-6G,人源通常檢測CD15 (Lewis X)、CD16 (FcγRIII);
活化/記憶T細(xì)胞亞群 :小鼠源通常檢測CD62L 和 CD44,人源通常檢測CD45RA 和 CD45RO;
因此,在檢測細(xì)胞流式標(biāo)志物時,必須摒棄簡單的“名稱對應(yīng)”思維,轉(zhuǎn)而采用 “功能/細(xì)胞類型對應(yīng)” 的思維,必須要查閱文獻了解清楚物種背景,選擇合適的標(biāo)志物,尤其是在跨種屬對比檢測時,一定要選擇在兩者上都表達且功能保守的分子作為參照。
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標(biāo)志物 |
貨號 |
簡稱 |
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B220 |
APC Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3-6B2) |
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APC Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3.3A 1/6.1) |
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SUNNCELL®488 Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3.3A 1/6.1) |
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SUNNCELL®488 Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3-6B2) |
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SUNNCELL®647 Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3.3A 1/6.1) |
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SUNNCELL®Violet 450 Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3-6B2) |
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SUNNCELL®Violet 540 Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3.3A 1/6.1) |
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FITC Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3-6B2) |
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FITC Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3.3A 1/6.1) |
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PE Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3-6B2) |
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PE Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3.3A 1/6.1) |
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PE-Cy5 Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3.3A 1/6.1) |
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PerCP Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3.3A 1/6.1) |
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PerCP-Cy5.5 Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3.3A 1/6.1) |
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PerCP-Cy5.5 Anti-Mouse CD45R/B220 Antibody(RA3-6B2) |
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F4/80 |
APC Anti-Mouse F4/80 Antibody(CI:A3-1) |
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SUNNCELL®488 Anti-Mouse F4/80 Antibody(CI:A3-1) |
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SUNNCELL®647 Anti-Mouse F4/80 Antibody(CI:A3-1) |
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SUNNCELL®Violet 450 Anti-Mouse F4/80 Antibody(CI:A3-1) |
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FITC Anti-Mouse F4/80 Antibody(CI:A3-1) |
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PE Anti-Mouse F4/80 Antibody(CI:A3-1) |
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PE-Cy7 Anti-Mouse F4/80 Antibody(CI:A3-1) |
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PerCP-Cy5.5 Anti-Mouse F4/80 Antibody(CI:A3-1) |
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SUNNCELL®700 Anti-Mouse F4/80 Antibody(CI:A3-1) |
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SUNNCELL®Violet 500 Anti-Mouse F4/80 Antibody(CI:A3-1) |
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SUNNCELL®Violet 610 Anti-Mouse F4/80 Antibody(CI:A3-1) |
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PE-Cy5 Anti-Mouse F4/80 Antibody(CI:A3-1) |
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PE-Cy5.5 Anti-Mouse F4/80 Antibody(CI:A3-1) |
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PE-SUNNCELL®594 Anti-Mouse F4/80 Antibody(CI:A3-1) |
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NK1.1 |
APC Anti-Mouse NK1.1(PK136) |
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SUNNCELL®700 Anti-Mouse NK1.1(PK136) |
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FITC Anti-Mouse NK1.1(PK136) |
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PE Anti-Mouse NK1.1(PK136) |
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PE-Cy7 Anti-Mouse NK1.1(PK136) |
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SUNNCELL®488 Anti-Mouse CD161/NK1.1 Antibody(PK136) |
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SUNNCELL®647 Anti-Mouse CD161/NK1.1 Antibody(PK136) |
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SUNNCELL®Violet 450 Anti-Mouse CD161/NK1.1 Antibody(PK136) |
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PE-Cy5 Anti-Mouse CD161/NK1.1 Antibody(PK136) |
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PE-Cy5.5 Anti-Mouse CD161/NK1.1 Antibody(PK136) |
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PerCP-Cy5.5 Anti-Mouse CD161/NK1.1 Antibody(PK136) |
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