正確操作人鼻病毒1B型PCR試劑盒的方法
樣本處理：
采集鼻咽拭子后，將樣本振蕩混勻，取200μL使用磁珠法提取核酸。
提取后立即檢測或-20℃保存（避免反復凍融）。
加樣與擴增：
取5μL核酸加入反應管，同步加入陰陽性質(zhì)控品。
設置三步法PCR循環(huán)程序：預變性（95℃ 30秒）、退火（55℃ 30秒）、延伸（72℃ 30秒），共40循環(huán)。
結(jié)果判讀：
熒光定量PCR直接讀取Ct值，35-38為弱陽性。
瓊脂糖凝膠電泳需觀察目標條帶（陽性樣本出現(xiàn)亮帶）。
注意事項
污染防控：
設立獨立試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)，使用帶濾芯吸頭。
超凈臺紫外消毒15分鐘，避免裸手接觸PCR管。
試劑保存：
-20℃避光保存，運輸需低溫，避免反復凍融。
操作規(guī)范：
嚴格按說明書操作，不同批次試劑需預實驗驗證。
記錄加樣順序、儀器參數(shù)等關鍵信息。
污染防控措施
1. 實驗分區(qū)必須嚴格執(zhí)行"試劑準備區(qū)-樣本處理區(qū)-擴增區(qū)"的單向流動，各區(qū)域儀器設備不得混用。每日實驗結(jié)束后需用10%次氯酸鈉擦拭臺面，UV照射30分鐘。
2. 所有廢棄耗材需經(jīng)121℃高壓滅菌處理，特別注意氣溶膠污染防控。建議每月使用氣溶膠檢測試劑盒評估實驗室環(huán)境狀況。
采集鼻咽拭子后，將樣本振蕩混勻，取200μL使用磁珠法提取核酸。
提取后立即檢測或-20℃保存（避免反復凍融）。
加樣與擴增：
取5μL核酸加入反應管，同步加入陰陽性質(zhì)控品。
設置三步法PCR循環(huán)程序：預變性（95℃ 30秒）、退火（55℃ 30秒）、延伸（72℃ 30秒），共40循環(huán)。
結(jié)果判讀：
熒光定量PCR直接讀取Ct值，35-38為弱陽性。
瓊脂糖凝膠電泳需觀察目標條帶（陽性樣本出現(xiàn)亮帶）。
注意事項
污染防控：
設立獨立試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)，使用帶濾芯吸頭。
超凈臺紫外消毒15分鐘，避免裸手接觸PCR管。
試劑保存：
-20℃避光保存，運輸需低溫，避免反復凍融。
操作規(guī)范：
嚴格按說明書操作，不同批次試劑需預實驗驗證。
記錄加樣順序、儀器參數(shù)等關鍵信息。
污染防控措施
1. 實驗分區(qū)必須嚴格執(zhí)行"試劑準備區(qū)-樣本處理區(qū)-擴增區(qū)"的單向流動，各區(qū)域儀器設備不得混用。每日實驗結(jié)束后需用10%次氯酸鈉擦拭臺面，UV照射30分鐘。
2. 所有廢棄耗材需經(jīng)121℃高壓滅菌處理，特別注意氣溶膠污染防控。建議每月使用氣溶膠檢測試劑盒評估實驗室環(huán)境狀況。
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