流式、免疫熒光、免疫組化等實(shí)驗(yàn)用的抗體有什么區(qū)別？
流式、免疫熒光、免疫組化還有WB、ELISA等都是基于抗原抗體特異性反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，其核心就是抗體，本質(zhì)上都是一樣的東西，只是由于儀器、原理、檢測方式的差異，抗體的特異性、靈敏度、宿主、是否標(biāo)記等方面有區(qū)別。
1流式檢測
1. 主要設(shè)備
流式細(xì)胞儀：流式細(xì)胞儀是一種在液流系統(tǒng)中快速檢測單個(gè)細(xì)胞或多個(gè)微粒的多種物理和化學(xué)特性的生物醫(yī)學(xué)儀器，它結(jié)合了流體學(xué)、光學(xué)、電子學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)等多種技術(shù)，能夠?qū)?xì)胞進(jìn)行多參數(shù)、定量的分析和分選。簡單來說，它可以被視為一個(gè) “細(xì)胞的超高速拍照和分揀系統(tǒng)” ，它讓細(xì)胞排成單列逐個(gè)通過一個(gè)檢測點(diǎn)，在瞬間對(duì)其進(jìn)行“拍照”（檢測光學(xué)信號(hào)），然后根據(jù)“照片”的特征，決定是否給這個(gè)細(xì)胞帶上電荷，從而將其分選到指定的容器中。
2. 實(shí)驗(yàn)原理
通過熒光物質(zhì)直接標(biāo)記抗體，與細(xì)胞懸液孵育后，通過流式細(xì)胞儀激發(fā)并檢測細(xì)胞上的熒光情況，進(jìn)行結(jié)果分析或分選。屬于抗體的直接法應(yīng)用。
3. 抗體特性
-
大多采用精選高靈敏度、高特異性單克隆抗體，降低非特異性反應(yīng)，提高檢出率
-
多數(shù)抗體是針對(duì)細(xì)胞表面抗原，只有少數(shù)針對(duì)胞內(nèi)抗原（需破膜）
-
熒光物質(zhì)直接標(biāo)記，直接法檢測，無需復(fù)雜的酶標(biāo)二抗、生物素等信號(hào)放大系統(tǒng)
4. 結(jié)果呈現(xiàn)
▲左：SNFA-311流式檢測直方圖 右：SNFA-311流式檢測散點(diǎn)圖
2、免疫熒光、免疫組化、WB及ELISA等實(shí)驗(yàn)
1. 主要設(shè)備
免疫熒光：熒光顯微鏡等
免疫組化：普通光學(xué)顯微鏡等
WB：電泳儀、轉(zhuǎn)印儀、ECL發(fā)光檢測儀或膠片等
ELISA：酶標(biāo)板、酶標(biāo)儀等
2. 實(shí)驗(yàn)原理
待樣本處理好后，先與一抗抗體孵育結(jié)合，再通過通用酶標(biāo)或熒光二抗與一抗抗體孵育結(jié)合，最后通過酶標(biāo)或熒光二抗與底物或者激發(fā)光激發(fā)后檢測。多屬于抗體的間接法應(yīng)用，需要配合二抗或者其他信號(hào)放大系統(tǒng)使用。
3. 抗體特性
-
純化的單克隆抗體或者多克隆抗體，種屬、特異性、靈敏度要求低于流式抗體
-
不同實(shí)驗(yàn)技術(shù)，可以檢測胞內(nèi)、胞外、細(xì)胞膜幾乎所有部位的抗原
-
多數(shù)是間接法檢測，檢測結(jié)果一定程度受二抗、信號(hào)放大系統(tǒng)影響，實(shí)驗(yàn)周期長
4. 結(jié)果呈現(xiàn)
綜上，流式抗體與常規(guī)免疫熒光、免疫組化等使用的抗體雖然本質(zhì)上是一樣的，但是由于技術(shù)需求不同，實(shí)際抗體性質(zhì)、使用方式、檢測內(nèi)容等多方面參數(shù)都會(huì)有區(qū)別，需要根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)需要甄別選擇哦。
尚恩產(chǎn)品推薦
【SNFA-311】FITC Anti-Mouse CD4 (GK1.5)
- 普瑞邦邀您參加真菌毒素檢測技術(shù)交流會(huì)
- 奎克泰推出中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)(NETs)檢測試劑盒
- 慶祝西美杰榮獲科興“聚勢•卓越貢獻(xiàn)獎(jiǎng)”
- IPHASE/匯智和源亮相BIONNOVA生物醫(yī)藥創(chuàng)新者論壇
- IPHASE——?jiǎng)?chuàng)新藥體外評(píng)價(jià)生物試劑國產(chǎn)替代先行者
- IPHASE精彩亮相BIOCHINA2025易貿(mào)生物產(chǎn)業(yè)展覽
- IPHASE邀您相聚第64屆美國毒理學(xué)會(huì)年會(huì)SOT 2025
- IPHASE亮相第十四屆藥理學(xué)會(huì)藥物和化學(xué)異物代謝會(huì)議
Copyright(C) 1998-2026 生物器材網(wǎng) 電話：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com