快速流式細胞儀助力外周血單核細胞與進行性青光眼性視力喪失的研究
Orflo快速流式細胞儀助力外周血單核細胞的呼吸功能與進行性青光眼性視力喪失相關研究
青光眼是一種慢性進行性的視神經疾病，預計到2030年全球青光眼患者將增至約 8000 萬，其主要病理表現(xiàn)為視網(wǎng)膜神經節(jié)細胞（RGC ）死亡導致視力喪失。高眼壓（IOP）和高齡是最重要誘因，而降眼壓治療做為目前唯一有效的干預措施，治療后仍有大量患者（60% 歐洲裔和 90% 亞洲裔）出現(xiàn)視力惡化。多項研究指出，線粒體能量代謝異常和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）水平下降可能與青光眼發(fā)病及進展相關，但尚無明確顯示其與青光眼進展之間的關聯(lián)程度，以及其作為預測疾病進展速度的生物標志物的潛力。
為了探究線粒體功能紊亂對神經退行性病變的潛在原因和后果，2024年5月英國國家健康研究所聯(lián)合倫敦大學眼科研究所、意大利阿伏伽德羅大學、瑞典圣埃里克眼科醫(yī)院等多中心開展題為“Peripheral blood mononuclear cell respiratory function is associated with progressive glaucomatous vision loss”的外周血單核細胞的呼吸功能與進行性青光眼性視力喪失相關研究，相關結果發(fā)表在《Nature medicine》上。
本研究中Seahorse XFe24 設備測量外周血單個核細胞中的氧氣消耗（OCR）量。為評估各組間OCR差異是否源于PBMC亞群構成的不同，研究者使用美國Orflo Technologies公司的Moxi Go II快速流式細胞儀對所有受試者的淋巴細胞和單核細胞群體進行細胞計數(shù)，并在 FlowJo 平臺上完成亞群分析，確保用于OCR檢測的細胞濃度準確一致（8×106 個細胞/mL），保證線粒體呼吸功能檢測的可靠性。根據(jù)細胞大小設定門控參數(shù)，區(qū)分淋巴細胞和單核細胞，驗證青光眼患者與對照組 PBMC 亞群組成無差異，排除細胞類型混雜對 OCR 結果的干擾（圖Supp Fig. 17）。
Supp Fig. 17 對外周血單個核細胞（PBMC）進行了流式細胞術檢測：使用針對單核細胞（CD14）和淋巴細胞（CD3 – T cells、CD19 – B cells）的抗體作為陽性對照，使用 IgG1 作為陰性對照（綠色）。
B 細胞和 T 細胞（紅色和藍色群體）的大小在 5.5 - 8.5um之間，而單核細胞（橙色）則大于 8.5um。
- 1：3 秒完成 PBMC 精準計數(shù)
無需鞘液，60 μl 精準測定細胞計數(shù)，CV＜5%，讓 Seahorse XFe24 每孔 8×10⁴ 細胞標準化“零偏差”，保障實驗基礎數(shù)據(jù)的準確性。
- 2：一機多用：計數(shù) + 活力評估+ 流式亞群分析
內置 561 nm 長壽命激光，CD14/CD3/CD19 一鍵分型，實時質控單核/淋巴細胞比例，排除樣本異質性干擾。
- 3：真正“隨到隨做”
免維護、免校準，從采血到上機 <15 min，COVID 期間也能高效完成 218 例臨床樣本。
本研究以外周血單個核細胞（PBMC）為模型，發(fā)現(xiàn)原發(fā)性開角型青光眼（POAG）患者 PBMC 線粒體耗氧率（OCR）顯著低于年齡匹配對照，正常眼壓型青光眼患者 OCR 更低；PBMC 總 NAD 水平亦下降，且與 OCR 呈強正相關。由此，PBMC 線粒體功能及 NAD 水平可作為預測青光眼進展的新型血液生物標志物。
美國Orflo Technologies公司是一家非常專業(yè)的細胞分析儀器研發(fā)和制造企業(yè)，擁有多項專利技術，產品以庫爾特原理的高精細胞計數(shù)儀和超快流式細胞儀為主。
環(huán)亞生物，生命科學產品全國性代理商，不斷把國外頂級的創(chuàng)新產品引入中國。環(huán)亞生物具備完善的公司運營、產品管理、營銷、售前技術支持和售后維修體系。作為Orflo Technologies中國地區(qū)獨家代理，環(huán)亞生物科技有限公司全權負責Orflo Technologies產品在中國地區(qū)的推廣、銷售，為廣大用戶提供專業(yè)的技術咨詢和產品服務。
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https://doi.org/10.1038/s41591-024-03068-6
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