葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)揭示植物促生菌提升番茄熱波耐受新路徑
瀏覽次數(shù):438 發(fā)布日期:2025-9-1
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今年三伏雖已結(jié)束,但全國多地仍將持續(xù)35℃甚至38℃以上高溫天氣,農(nóng)作物熱脅迫風(fēng)險仍較高。全球變暖、氣候惡化引發(fā)頻繁熱浪,番茄等高溫敏感型作物在這樣的氣候背景下,面臨光合效率下降、減產(chǎn)等挑戰(zhàn),通過育種、栽培等手段提升作物蔬果的熱耐受性至關(guān)重要。
針對這一農(nóng)業(yè)痛點,里斯本大學(xué)研究團隊在《Plant Stress》發(fā)表突破性成果:通過不同方法給番茄施用植物促生菌(PGPB),結(jié)合易科泰葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)對OJIP快速熒光動力學(xué)曲線、光化學(xué)參數(shù)等進(jìn)行分析、建模,精準(zhǔn)量化,研究PGPB及不同施用方法對提升番茄熱波脅迫(heat wave stress)耐受性的效果。
植物促生菌(PGPB)通過提高養(yǎng)分利用效率或增強脅迫耐受性來提升作物產(chǎn)量。針對特定非生物或生物脅迫而設(shè)計的合成細(xì)菌群落(SynCom)應(yīng)用是極具前景的工具——其中不僅微生物群落的設(shè)計是應(yīng)用成功的關(guān)鍵因素,SynCom施用技術(shù)的選擇也能增強其效用。
左圖為本文中使用的大型版FluorCam葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)(示意圖),右側(cè)為選區(qū)分析后的實時Fs熒光成像結(jié)果。系統(tǒng)具備葉綠素?zé)晒獬上窆δ埽可選配多光譜熒光成像,OJIP快速熒光動力學(xué)成像,UV-MCF紫外激發(fā)多光譜熒光成像等功能。成像面積35×35cm,滿足大型植物活體成像。
試驗方法:
研究中,首先利用鹽沼植物根際分離的4種菌,混合成PGPB Syncom,之后通過灌溉法(W)、種子接種法(SI)、藻酸鹽微球包埋法(AS)、葉面噴施法(LS)4種方法分別施用到兩組番茄植株上,對照組為未噴施組(NI)。之后對番茄進(jìn)行熱波暴露處理2天,其中25/21℃(day/night)作為對照組(C),42/38℃(day/night)為熱波處理(HW),處理完后在25/21℃(day/night)恢復(fù)14天為R組。
表型分析:
- 形態(tài)學(xué)指標(biāo):株高、活分支數(shù)、葉面積,其中葉面積由FluorCam葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)分析獲得。熱波處理時,藻酸鹽微球包埋法處理的番茄,株高和分枝數(shù)維持最佳(接近對照組),葉面噴施組葉面積顯著增加。恢復(fù)期,灌溉法和藻酸鹽微球組株高恢復(fù)最顯著。
- 光合響應(yīng):葉綠素?zé)晒獬上?mdash;—OJIP快速熒光動力學(xué)分析
1. 葉綠素?zé)晒鈪?shù)反映番茄光合狀態(tài)差異
- 熱波脅迫期:未噴施組(NI)的Fv/Fm顯著下降(PSII損傷),能量耗散(DI/RC)升高。PGPB噴施組,F(xiàn)v/Fm維持相對較高,推測PBPG施用提升番茄反應(yīng)中心密度(RC/ABS) 和降低能量耗散而緩解損傷。其中藻酸鹽微球組(AS)和葉面噴施組(LS)維持較高的Fv/Fm(>0.7),電子傳遞鏈(ET/RC)損傷最小,說明其對番茄熱波耐受性的改善最為顯著。
- 恢復(fù)期:藻酸鹽微球組(AS)和灌溉組(W)的Fv/Fm、ET/RC恢復(fù)至接近脅迫前水平。種子接種組(SI)熒光參數(shù)值與未接種組相似,恢復(fù)能力最弱。
2. OJIP快速熒光動力學(xué)曲線
OJIP曲線顯示,對照組(淺綠色)所有植株無論采用何種PGPB施用技術(shù),其考茨基曲線在形態(tài)和熒光強度方面均表現(xiàn)相似。當(dāng)熱波處理(紅色)后,未接種植株的熒光強度在整個曲線范圍內(nèi)急劇下降,同時喪失了曲線的拐點特征,在恢復(fù)期,熒光值增強,OJIP曲線拐點恢復(fù)恢復(fù)。在恢復(fù)期,LS、W、AS三種PGPB施用方式處理的番茄熒光增強最為明顯。
利用獲得的熒光數(shù)據(jù)采用PLS-DA法建模分析,能以極高精度展示溫度、施用方法的特異性熒光特征,準(zhǔn)確區(qū)分不同的PGPB施用方法對植物光化學(xué)產(chǎn)生的差異化影響,為未來采用該接種技術(shù)進(jìn)行表型評估提供了工具。結(jié)果表明,盡管PLS-DA雙標(biāo)圖中存在較大離散度,但采用藻酸鹽球體施用(AS)的植株在模型訓(xùn)練相位展現(xiàn)出非常特異性的熒光特征(組別準(zhǔn)確率達(dá)100%),展現(xiàn)出持續(xù)促進(jìn)植物生長和應(yīng)激反應(yīng)的高效性及可擴展性。
PGPB SynCom通過產(chǎn)生ACC脫氨酶,降低乙烯積累,減少PSII供體側(cè)損傷,從而促進(jìn)植株生長并提升光合效率。研究還發(fā)現(xiàn)脅迫緩解后能量耗散減少,表明PGPB SynCom應(yīng)用形成了高效的熱耗散機制。
葉綠素?zé)晒獬上袷侄尾粌H量化了PGPB對光系統(tǒng)的保護效應(yīng),還可作為PGPB接種效果的高通量表型工具,通過統(tǒng)計模型為施用技術(shù)優(yōu)化提供了可量化的表型標(biāo)記。從施用技術(shù)角度,在提升番茄熱波耐受性的效用方面,藻酸鹽微球包埋法 > 葉面噴施法 ≈ 灌溉法 > 種子接種法,而藻酸鹽微球法需接種劑量少、菌體存活率高,更適合規(guī);r(nóng)業(yè)應(yīng)用。
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