用于植物油快速質(zhì)控的自動(dòng)計(jì)算法以及品質(zhì)鑒定
用于植物油快速質(zhì)控的自動(dòng)計(jì)算法以及品質(zhì)鑒定
Peter J. Lee、Yoji Ichikawa、Roger R. Menard和Alice J. Di Gioia
沃特世公司，美國(guó)馬薩諸塞州米爾福德市
沃特世公司，美國(guó)馬薩諸塞州米爾福德市
引言
植物油是食品、化妝品和個(gè)人護(hù)理品的重要成分，主要來(lái)自于世界各地的22種油料作物。生產(chǎn)加工、貯存、運(yùn)輸和銷售各環(huán)節(jié)都對(duì)植物油的質(zhì)量起著至關(guān)重要的作用。偶發(fā)事件和故意事件均會(huì)導(dǎo)致植物油的交叉污染�，F(xiàn)已頒布了包括315/93/EEC、2568/91/EEC、EC 333/2007和EC 640/2008在內(nèi)的多部法規(guī)，要求鑒定植物油的品質(zhì)，并避免污染，從而保障公共健康和公平交易。
植物油是食品、化妝品和個(gè)人護(hù)理品的重要成分，主要來(lái)自于世界各地的22種油料作物。生產(chǎn)加工、貯存、運(yùn)輸和銷售各環(huán)節(jié)都對(duì)植物油的質(zhì)量起著至關(guān)重要的作用。偶發(fā)事件和故意事件均會(huì)導(dǎo)致植物油的交叉污染�，F(xiàn)已頒布了包括315/93/EEC、2568/91/EEC、EC 333/2007和EC 640/2008在內(nèi)的多部法規(guī)，要求鑒定植物油的品質(zhì)，并避免污染，從而保障公共健康和公平交易。
為了確保產(chǎn)品質(zhì)量，滿足法規(guī)要求并維護(hù)公司最有價(jià)值的資產(chǎn)——品牌形象，植物油公司對(duì)植物油的生產(chǎn)過(guò)程，從原料到成品全過(guò)程進(jìn)行監(jiān)控。目前，植物油分析主要依靠氣相色譜法(GC)和高效液相色譜法(HPLC)。氣相色譜法要求在分析前進(jìn)行衍生化，這既耗時(shí)又費(fèi)力2。為了實(shí)現(xiàn)完全分離，普通的高效液相色譜法要求使用鹵代溶劑或使用會(huì)使運(yùn)行時(shí)間更長(zhǎng)的非鹵代溶劑3-6，。自鹵代溶劑被認(rèn)識(shí)到具有致癌作用后，鹵代溶劑的使用在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室受到了限制。因此，人們對(duì)用于植物油質(zhì)量控制和品質(zhì)鑒定更有效的分析工具的需求日漸增加。
ACQUITY UPLC®系統(tǒng)是新一代液相色譜平臺(tái)。使用UPLC®/PDA/ELSD/質(zhì)譜檢測(cè)器，可以更快進(jìn)行篩選、在不使用鹵代溶劑7-10條件下對(duì)植物油的表征建立高分離度的方法。只需一次進(jìn)樣，超高效液相色譜(UPLC)系統(tǒng)就能得到多種類型的數(shù)據(jù)，產(chǎn)生重現(xiàn)好的指紋圖譜數(shù)據(jù)，鑒別甘油三酸酯的組分，并評(píng)估植物油氧化和分解程度。與普通的高效液相色譜相比，超高效液相色譜縮短了分析時(shí)間，減少了溶劑用量，并能從一次進(jìn)樣中提供更高分離度并帶有更多信息的色譜圖。因此，超高效液相色譜法的性價(jià)比更高。本技術(shù)文獻(xiàn)描述了用于植物油質(zhì)控和品質(zhì)鑒定的更為高效的系統(tǒng)解決方案，即使用UPLC和EmpowerTM 2軟件的用戶自定義字段的計(jì)算功能，自動(dòng)定量并報(bào)告植物油樣品是否符合用戶設(shè)定的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。此方案不再需要人工計(jì)算，從而避免了可能的人為誤差并能夠快速而準(zhǔn)確地報(bào)告關(guān)鍵信息。掌握了準(zhǔn)確、及時(shí)的結(jié)果，決策者就能提高交貨效率和產(chǎn)量，即減少不合格產(chǎn)品，避免產(chǎn)品召回，并最大限度地減少責(zé)任訴訟。本文的實(shí)驗(yàn)部分提供了關(guān)于自定義字段計(jì)算的例子，并附有其詳細(xì)步驟。
實(shí)驗(yàn)
樣品準(zhǔn)備：
食用油，購(gòu)買自當(dāng)?shù)氐氖称冯s貨店。用2-丙醇將食用油樣品
稀釋為6 mg/ml的溶液，以備分析之用。
超高效液相色譜條件：
超高效液相色譜系統(tǒng)： ACQUITY UPLC，PDA檢測(cè)器
軟件： Empower 2
PDA參數(shù)：
檢測(cè)波長(zhǎng)： 195-300nm
采樣率： 20 pts/s
過(guò)濾響應(yīng)速度： 快
超高效液相色譜參數(shù)：
色譜柱： ACQUITY BEH C18 2.1 x 150 mm
弱洗脫： 2-丙醇(每次洗脫用量：500 μL)
強(qiáng)洗脫： 2-丙醇(每次洗脫用量：500 μL)
充填洗脫： 10%的CH3CN水溶液(每5分鐘)
流動(dòng)相A： CH3CN
流動(dòng)相B： 2-丙醇
柱溫： 30°C
進(jìn)樣量： 2 μL(滿環(huán)定量)
梯度條件：
時(shí)間 (min) 流速 (mL/min) %B 曲線
0 0.15 10 —
22 0.15 90 6
平衡色譜柱和UPLC系統(tǒng)條件：
時(shí)間 (min) 流速 (mL/min) %B 曲線
0 0.13 100 —
18 0.13 10 11
21.5 0.7 10 11
24.5 0.15 10 11
25 0.15 10 11
說(shuō)明：運(yùn)行樣品組之前，先進(jìn)一針空白試樣2-丙醇；該檢測(cè)值被用作PDA 3D譜圖的空白扣除。
用于鑒定特純天然橄欖油A質(zhì)量的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)：
為了便于演示，我們從純天然橄欖油A的典型色譜圖中選取六個(gè)峰。選擇其中的一個(gè)峰作為標(biāo)記峰，其余的峰為指示峰�！胺迕娣e比(指示峰面積除以標(biāo)記峰面積)±3xSTDEV”用作指示峰的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。
1. 指示峰3O(峰面積OOL/標(biāo)記峰面積)>0.84或<0.86，則合格；否則不合格。
2. 指示峰OOL(峰面積OOL/標(biāo)記峰面積)>1.18或<1.21，則合格；否則不合格。
3. 指示峰LLO(峰面積LLO/標(biāo)記峰面積)>0.39或<0.41，則合格；否則不合格。
4. 指示峰LLL(峰面積LLL/標(biāo)記峰面積)>0.039或<0.045，則合格；否則不合格。
5. 指示雜質(zhì)峰(雜質(zhì)峰面積/標(biāo)記峰面積)<0.42，則合格；否則不合格。
3. 指示峰LLO(峰面積LLO/標(biāo)記峰面積)>0.39或<0.41，則合格；否則不合格。
4. 指示峰LLL(峰面積LLL/標(biāo)記峰面積)>0.039或<0.045，則合格；否則不合格。
5. 指示雜質(zhì)峰(雜質(zhì)峰面積/標(biāo)記峰面積)<0.42，則合格；否則不合格。
創(chuàng)建計(jì)算峰面積比自定義字段的步驟11 ：
1. 點(diǎn)擊“配置系統(tǒng)”，進(jìn)入配置管理員；在樹形結(jié)構(gòu)中點(diǎn)擊“項(xiàng)目”。
2. 選擇并右擊所需的項(xiàng)目。
3. 選擇“屬性”，打開“項(xiàng)目屬性”窗口。
4. 點(diǎn)擊“自定義字段”標(biāo)簽；然后點(diǎn)擊“新建”，打開“數(shù)據(jù)和類型選擇”窗口(圖1)。
5. 在字段類型中選取“峰”，在數(shù)據(jù)類型中選取“實(shí)數(shù)(0.0)”；然后點(diǎn)擊“下一步”打開“選擇來(lái)源”窗口，如圖2所示。
6. 在“數(shù)據(jù)來(lái)源”中選擇“計(jì)算”，在“樣品類型”和“峰類型”中選擇“全部”；在“搜索順序”中選擇“只限于結(jié)果組”，然后在彈出窗口中點(diǎn)擊確定”；不要勾選“全部或沒(méi)有”以及“丟失峰”選項(xiàng)；點(diǎn)擊“下一步”，打開“輸入公式”窗口，如圖3所示。
7. 將面積/IS[面積]輸入至字段中；點(diǎn)擊“下一步”，打開“數(shù)值型參數(shù)”窗口(使用默認(rèn)值)。
8. 點(diǎn)擊“下一步”，打開“輸入名稱”窗口。
9. 輸入新的字段名(例如，此處所用的字段名是“Ratio _IS”)；在“創(chuàng)建該字段”中選擇“項(xiàng)目”。
10. 點(diǎn)擊“完成”，這樣就創(chuàng)建了一個(gè)名為“Ratio_IS”的自定義字段，用于計(jì)算峰面積比，如圖4所示。
創(chuàng)建自定義字段并根據(jù)特定指示峰面積比的標(biāo)準(zhǔn)確定“合格”或“不合格”的步驟如下：
1. 點(diǎn)擊“配置系統(tǒng)”，打開配置管理員；在樹形結(jié)構(gòu)中點(diǎn)擊“項(xiàng)目”。
2. 選擇并右擊所選擇的工作項(xiàng)目。
3. 選擇“屬性”，打開“項(xiàng)目屬性”窗口。
4. 點(diǎn)擊“自定義字段”標(biāo)簽；然后點(diǎn)擊“新建”，打開“數(shù)據(jù)和類型選擇”窗口，如圖1所示。
5. 在字段類型中選擇“峰”，在數(shù)據(jù)類型中選取“布爾(0.0)”；然后點(diǎn)擊“下一步”，打開“選擇來(lái)源”窗口。
6. 在“數(shù)據(jù)來(lái)源”中選擇“計(jì)算”，在“樣品類型”和“峰類型”中選擇“全部”；在“搜索順序”中選擇“只限于結(jié)果組”，然后在彈出窗口中點(diǎn)擊“確定”；選擇“全部或沒(méi)有”選項(xiàng)，在彈出窗口中點(diǎn)擊“是”；然后點(diǎn)擊“下一步”，打開“輸入公式”窗口。
7. 將以下公式輸入至字段中：
GTE(3O[Ratio_IS],0.841)<E(3O[Ratio_IS],0.859])*EQ(Name,“3O”)+NEQ(Name,”3O”)*-1*50000
8. 點(diǎn)擊“下一步”，打開“翻譯定義”窗口，如圖5所示。
9. 在“0”旁邊，輸入“不合格”；在“1”旁邊，輸入“合格”；然后點(diǎn)擊“下一步”，打開“輸入名稱”窗口。
10. 輸入一個(gè)名稱(例如，此處使用的是“Oly_OOO”)；在“創(chuàng)建該字段”中選擇“項(xiàng)目”。
11. 點(diǎn)擊“完成”，這就創(chuàng)建了一個(gè)名為“Oly_OOO”的自定義字段用于檢驗(yàn)峰面積比(OOO峰面積除以標(biāo)記峰面積)是否符合指示峰OOO的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，如圖6所示。重復(fù)進(jìn)行第1-8步，以確定其余的指示峰是否合格：對(duì)于指示峰OOL，在第4步中，在“輸入公式”窗口中輸入以下公式：
GTE(OOL[Ratio_IS],1.18)<E(OOL[Ratio_IS],1.21])*EQ(Name,“OOL”)+NEQ(Name,“OOL”)*-1*50000. 在第7步中，在字段名中輸入“Oly_OOL”，創(chuàng)建字段“Oly_OOL”，以檢驗(yàn)峰面積比(OOL峰面積除以標(biāo)記峰面積)是否符合質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于指示峰LLO，在第4步中，在“輸入公式”窗口中輸入以下公式：
GTE(LLO[Ratio_IS],0.39)<E(LLO[Ratio_IS],0.41])*EQ(Name,“LLO”)+NEQ(Name,“LLO”)*-1*50000. 在第7步中，在字段名中輸入“Oly_LLO”，創(chuàng)建字段“Oly_LLO”， 以檢驗(yàn)峰面積比(LLO峰面積除以標(biāo)記峰面積)是否符合質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于指示峰LLL，在第4步中，在“輸入公式”窗口中輸入以下公式：
GTE(LLL[Ratio_IS],0.039)<E(LLL[Ratio_IS],0.045])*EQ(Name,“LLL”)+NEQ(Name,“LLL”)*-1*50000. 在第7步中，在字段名中輸入“Oly_ LLL”，創(chuàng)建字段“Oly_ LLL”， 以檢驗(yàn)峰面積比(LLL峰面積除以標(biāo)記峰面積)是否符合質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。
1. 點(diǎn)擊“配置系統(tǒng)”，打開配置管理員；在樹形結(jié)構(gòu)中點(diǎn)擊“項(xiàng)目”。
2. 選擇并右擊所選擇的工作項(xiàng)目。
3. 選擇“屬性”，打開“項(xiàng)目屬性”窗口。
4. 點(diǎn)擊“自定義字段”標(biāo)簽；然后點(diǎn)擊“新建”，打開“數(shù)據(jù)和類型選擇”窗口，如圖1所示。
5. 在字段類型中選擇“峰”，在數(shù)據(jù)類型中選取“布爾(0.0)”；然后點(diǎn)擊“下一步”，打開“選擇來(lái)源”窗口。
6. 在“數(shù)據(jù)來(lái)源”中選擇“計(jì)算”，在“樣品類型”和“峰類型”中選擇“全部”；在“搜索順序”中選擇“只限于結(jié)果組”，然后在彈出窗口中點(diǎn)擊“確定”；選擇“全部或沒(méi)有”選項(xiàng)，在彈出窗口中點(diǎn)擊“是”；然后點(diǎn)擊“下一步”，打開“輸入公式”窗口。
7. 將以下公式輸入至字段中：
GTE(3O[Ratio_IS],0.841)<E(3O[Ratio_IS],0.859])*EQ(Name,“3O”)+NEQ(Name,”3O”)*-1*50000
8. 點(diǎn)擊“下一步”，打開“翻譯定義”窗口，如圖5所示。
9. 在“0”旁邊，輸入“不合格”；在“1”旁邊，輸入“合格”；然后點(diǎn)擊“下一步”，打開“輸入名稱”窗口。
10. 輸入一個(gè)名稱(例如，此處使用的是“Oly_OOO”)；在“創(chuàng)建該字段”中選擇“項(xiàng)目”。
11. 點(diǎn)擊“完成”，這就創(chuàng)建了一個(gè)名為“Oly_OOO”的自定義字段用于檢驗(yàn)峰面積比(OOO峰面積除以標(biāo)記峰面積)是否符合指示峰OOO的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，如圖6所示。重復(fù)進(jìn)行第1-8步，以確定其余的指示峰是否合格：對(duì)于指示峰OOL，在第4步中，在“輸入公式”窗口中輸入以下公式：
GTE(OOL[Ratio_IS],1.18)<E(OOL[Ratio_IS],1.21])*EQ(Name,“OOL”)+NEQ(Name,“OOL”)*-1*50000. 在第7步中，在字段名中輸入“Oly_OOL”，創(chuàng)建字段“Oly_OOL”，以檢驗(yàn)峰面積比(OOL峰面積除以標(biāo)記峰面積)是否符合質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于指示峰LLO，在第4步中，在“輸入公式”窗口中輸入以下公式：
GTE(LLO[Ratio_IS],0.39)<E(LLO[Ratio_IS],0.41])*EQ(Name,“LLO”)+NEQ(Name,“LLO”)*-1*50000. 在第7步中，在字段名中輸入“Oly_LLO”，創(chuàng)建字段“Oly_LLO”， 以檢驗(yàn)峰面積比(LLO峰面積除以標(biāo)記峰面積)是否符合質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于指示峰LLL，在第4步中，在“輸入公式”窗口中輸入以下公式：
GTE(LLL[Ratio_IS],0.039)<E(LLL[Ratio_IS],0.045])*EQ(Name,“LLL”)+NEQ(Name,“LLL”)*-1*50000. 在第7步中，在字段名中輸入“Oly_ LLL”，創(chuàng)建字段“Oly_ LLL”， 以檢驗(yàn)峰面積比(LLL峰面積除以標(biāo)記峰面積)是否符合質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。
對(duì)于雜質(zhì)指示峰，在第4步中，在“輸入公式”窗口中輸入
以下公式：
GT(Impurity[Ratio_IS],0.42)*EQ(Name,”Impurity”)+NEQ(Name,“Impurity”)*-1*50000. 在第7步中，在字段名中輸入“Oly_Impurity”，創(chuàng)建字段“Oly_ Impurity”，以檢驗(yàn)峰面積比(雜質(zhì)峰面積除以標(biāo)記峰面積)是否符合質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。
本方法用定時(shí)組功能計(jì)算雜質(zhì)峰的總和：
1. 在“編輯處理方法”窗口中，選擇“定時(shí)組”標(biāo)簽，如圖7所示。
2. 在“名稱”字段中輸入雜質(zhì)名稱，在“開始時(shí)間”字段中輸入“3”，在“結(jié)束時(shí)間”字段中輸入“13.6”。
3. 勾選“不包括已知峰”字段。在處理方法中標(biāo)記選定的標(biāo)記峰和指示峰：
1. 在“編輯處理方法”窗口中選擇“組分”標(biāo)簽。
2. 將保留時(shí)間為9.81 min的峰名稱改為IS，在“峰標(biāo)簽”字段中輸入“標(biāo)記峰”，如圖8所示。
3. 將保留時(shí)間為13.79 min的峰名稱改為3L，在“峰標(biāo)簽”字段中輸入“LLL”。
4. 將保留時(shí)間為14.85 min的峰名稱改為2LO，在“峰標(biāo)簽”字段中輸入“LLO”。
5. 將保留時(shí)間為15.87 min的峰名稱改為2OL，在“峰標(biāo)簽”字段中輸入“OOL ”。
6. 將保留時(shí)間為16.85 min的峰名稱改為OOO，在“峰標(biāo)簽”字段中輸入“OOO”。
在處理方法中創(chuàng)建命名組的步驟：
1. 在“編輯處理方法”窗口中選擇“命名組”標(biāo)簽。
2. 在“名稱”欄中輸入3O、LLL、LLO、OOL和Oly，如圖9所示。
3. 分別將OOO、3L、2LO、2OL和IS從“單峰組分”拖至各自相應(yīng)的命名組中，如圖9所示。創(chuàng)建合格或不合格報(bào)告模板的步驟：
1. 點(diǎn)擊“方法”標(biāo)簽，選擇一份報(bào)告，右擊該報(bào)告；選擇“打開”，以顯示“編輯報(bào)告方法”窗口。
2. 在“編輯報(bào)告方法”窗口中選擇“新建”，打開“新方法／組”窗口。
3. 選擇“創(chuàng)建新報(bào)告方法”，勾選“使用報(bào)告方法／組向?qū)А边x項(xiàng)；然后點(diǎn)擊“確定”，打開“報(bào)告方法模板向?qū)А薄?BR>4. 選擇“單個(gè)報(bào)告”，然后點(diǎn)擊“下一步”，打開“新方法向?qū)А贝翱凇?BR>5. 在報(bào)告類型中選擇“單個(gè)”，然后點(diǎn)擊“完成”，顯示一個(gè)報(bào)告方法模板。
6. 在色譜圖上右擊，選擇“屬性”，打開“色譜圖屬性”窗口(圖10)。
7. 選擇“峰標(biāo)簽”，勾選“僅使用峰標(biāo)簽”，然后點(diǎn)擊“確定”。
8. 右鍵單擊“表”，選擇“屬性”，打開“表屬性”窗口。
9. 選擇“峰”標(biāo)簽，勾選“峰組”。
10. 點(diǎn)擊“表”標(biāo)簽，然后在樹形結(jié)構(gòu)中點(diǎn)擊所需的峰。雙擊每個(gè)指示峰，以將相應(yīng)的自定義字段添加到結(jié)果表格中，如圖11所示。
11. 點(diǎn)擊“確定”，輸入該報(bào)告模板的名稱(例如，此處顯示的名稱是“特級(jí)天然橄欖油質(zhì)控報(bào)告”)，然后在工具欄中點(diǎn)擊“保存”。
結(jié)果和討論
不使用鹵代溶劑做流動(dòng)相的普通高效液相色譜法很難分離植物油的主要組分——甘油三酸酯。圖12為普通高效液相色譜法(2根5μm粒徑顆粒填充的150mm長(zhǎng)的C18柱，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器ELSD)得到的大豆油的典型色譜圖，使用乙腈和二氯甲烷作為流動(dòng)相，實(shí)現(xiàn)該分離需要60多分鐘。由于二氯甲烷在240nm以內(nèi)具有紫外吸收，這會(huì)干擾甘油三酸酯的紫外吸收(最大波長(zhǎng)吸收值約210nm)，因此使用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)進(jìn)行檢測(cè)。
ACQUITY UPLC系統(tǒng)的設(shè)計(jì)特點(diǎn)是使用小顆粒裝填技術(shù)的高效色譜柱，以進(jìn)行更快速、更靈敏和更高分離度的分離。UPLC的溶劑傳送系統(tǒng)能承受高達(dá)15,000 psi的背壓，因此能夠使用2-丙醇等高黏度溶劑進(jìn)行植物油分析。由于2-丙醇對(duì)植物油的溶解性好12、低毒，透射度限制低，便于對(duì)甘油三酸酯進(jìn)行紫外檢測(cè)，因此2-丙醇被選作強(qiáng)洗脫液。圖13為關(guān)于同一大豆油樣品的10張疊加的紫外色譜圖說(shuō)明UPLC法的重現(xiàn)性，此分離使用1.7μm粒徑的2.1 x 150mm的 BEH C18色譜柱，乙腈/2-丙醇作為流動(dòng)相，整個(gè)運(yùn)行時(shí)間縮短為22分鐘。圖12和圖13比較，具有相似的甘油三酸酯峰型，但UPLC法具有更高的分離度，更短的運(yùn)行時(shí)間。數(shù)據(jù)表明不使用致癌溶劑作為流動(dòng)相，使用 UPLC分離植物油中的組分具有明顯優(yōu)勢(shì)。用于植物油分析的乙腈/2-丙醇流動(dòng)相的UPLC系統(tǒng)可使用PDA、ELSD和MS檢測(cè)器，不像其他用于普通高效液相色譜法的溶劑。一次進(jìn)樣便可得到多種數(shù)據(jù)類型，并可以產(chǎn)生可重現(xiàn)的指紋圖譜數(shù)據(jù)7，通過(guò)質(zhì)譜法鑒別甘油三酸酯組分10，并用PDA多波長(zhǎng)掃描測(cè)定植物油的氧化程度8。目前已知植物油具有特征的甘油三酸酯比，這對(duì)植物油指紋圖譜5-8的鑒別很有用。如圖14-16所示，核桃油、葡萄籽油、芝麻油、特級(jí)天然橄欖油A、特級(jí)天然橄欖油B、榛子油、茶籽油、玉米油、加拿大低酸油、高油酸葵花籽油和普通葵花籽油的紫外色譜圖證實(shí)，每種油樣品都具有獨(dú)特的色譜類型，即相對(duì)峰強(qiáng)度。
為了高效使用峰強(qiáng)度比進(jìn)行品牌質(zhì)控和質(zhì)量鑒定，Empower 2軟件的自定義字段計(jì)算功能可根據(jù)用戶設(shè)定的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)將原始色譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為合格或不合格報(bào)告。以特級(jí)天然橄欖油A為例說(shuō)明該改進(jìn)的方法。圖17為特級(jí)天然橄欖油A的疊加紫外色譜圖和峰面積。甘油三酸酯的峰面積從最強(qiáng)峰(OOL)到最弱峰(LLL)其RSD值(n=6)<0.9%。共有20多個(gè)可見峰，任一峰都能被用作標(biāo)記峰或指示峰，用以計(jì)算峰面積比。為了便于討論，將之前確定的甘油三酸酯的峰OOO、OOL、LLO和LLL選作指示峰10，將僅出現(xiàn)在橄欖油產(chǎn)品中、通過(guò)紫外檢測(cè)觀察到的保留時(shí)間為9.8分鐘的強(qiáng)峰選作標(biāo)記峰13。由于大多數(shù)廉價(jià)的蔬菜油和降解油具有很多保留時(shí)間低于13.6分鐘的其它強(qiáng)峰9，因此可用定時(shí)組功能(圖7)創(chuàng)建雜質(zhì)指示峰，以監(jiān)測(cè)是否存在污染。該雜質(zhì)指示峰是指標(biāo)記峰之外的保留時(shí)間介于3-13.6分鐘的所有峰的總和。通過(guò)創(chuàng)建自定建自定義字段“Ratio_IS”(圖4)，可用Empower 2軟件自動(dòng)計(jì)算峰面積比(指示峰面積除以標(biāo)記峰面積)。表1總結(jié)了峰面積比的結(jié)果以及STDEV值�！胺迕娣e比±3xST-DEV”被用作每個(gè)指示峰的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。由于地理和其它種植條件的差異，植物油的某一特定類型會(huì)存在差異。該數(shù)值在比較其它植物油樣品是否符合基于特定油品的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)方面具有極大的價(jià)值。
現(xiàn)在，Empower 2軟件能夠使用自定義字段計(jì)算、命名組、定時(shí)組和報(bào)告模板(如圖6、7、9、10和11所示)，根據(jù)特級(jí)天然橄欖油A的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，自動(dòng)計(jì)算并報(bào)告樣品合格與否的結(jié)果。圖18為特級(jí)天然橄欖油A的典型Empower質(zhì)控報(bào)告。該報(bào)告表明所有指示峰均符合質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。Empower軟件的這些高級(jí)功能避免了人工計(jì)算步驟，因此能避免可能出現(xiàn)的人為誤差。
昂貴的特級(jí)天然橄欖油通常會(huì)被摻入廉價(jià)橄欖油和其它植物油(例如大豆油和榛子油)。圖19為一份特級(jí)天然橄欖油B的報(bào)告。所有指示峰均表明該特級(jí)天然橄欖油B未通過(guò)根據(jù)特級(jí)天然橄欖油A制定的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。在該色譜圖中存在保留時(shí)間<13.6 min的額外峰，這些數(shù)據(jù)清楚地表明兩種品牌的橄欖油樣品存在差異，并證實(shí)并非所有市售的特級(jí)天然橄欖油的品質(zhì)都相同。圖20為一份摻入9%榛子油的特級(jí)天然橄欖油A的報(bào)告。所有指示峰均表明該摻假樣品不符合質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。而且，根據(jù)特級(jí)天然橄欖油A制定的同一質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)也應(yīng)用于分析其它植物油(圖14-16)，同樣摻入1%大豆油或1%玉米油的特級(jí)天然橄欖油A，均不合格。
之前描述的是使用UPLC-TOF和集成軟件工具檢測(cè)橄欖油摻假的化學(xué)計(jì)量方法14。本技術(shù)文獻(xiàn)為植物油質(zhì)控和品質(zhì)鑒定提供了可供選擇的另一種解決方案。本方法可完全自動(dòng)地獲取并處理數(shù)據(jù)，從而生成明確的合格或不合格報(bào)告。
結(jié)論
具有Empower 2 軟件的ACQUITY UPLC系統(tǒng)能不需要衍生化和鹵化溶劑，且能快速分析植物油樣品并進(jìn)行品質(zhì)鑒定。
UPLC系統(tǒng)得出的數(shù)據(jù)具有良好的重現(xiàn)性、精確性和準(zhǔn)確性，而且簡(jiǎn)單易懂。分離速度比普通高效液相色譜法快三倍，所消耗的溶劑量減少8倍，所產(chǎn)生的有害廢物也減少8倍；從而能夠節(jié)省成本，提高安全性。ACQUITY PDA檢測(cè)器能產(chǎn)生高分離度和高重現(xiàn)性的數(shù)據(jù)，這有助于輕松建立用于制定每種品牌植物油的質(zhì)控和品質(zhì)鑒定標(biāo)準(zhǔn)的指紋圖譜數(shù)據(jù)。借助Empower 2軟件的自定義字段計(jì)算功能，關(guān)鍵的產(chǎn)品質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)可從原始數(shù)據(jù)中準(zhǔn)確得出并根據(jù)用戶設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)快速傳送，有效地出具簡(jiǎn)單易懂的合格或不合格報(bào)告。決策者能根據(jù)這些重要信息及時(shí)做出決定，從而提高生產(chǎn)率。使用本UPLC方法，植物油公司能夠輕松自信地鑒定產(chǎn)品的品質(zhì)和質(zhì)量。與植物油產(chǎn)品純度方面利益相關(guān)的其他行業(yè)，例如化妝品公司、個(gè)人護(hù)理品公司和食品公司，也將從本方法中受益。
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exact mass capabilities are needed in order to properly elucidate its chemical
structure. However, it is not necessary to have peak identification for this QC
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關(guān)于沃特世公司 (www.waters.com)
50多年來(lái)，沃特世公司(NYSE:WAT)通過(guò)提供實(shí)用和可持續(xù)的創(chuàng)新，使醫(yī)療服務(wù)、環(huán)境管理、食品安全和全球水質(zhì)監(jiān)測(cè)領(lǐng)域有了顯著進(jìn)步，從而為實(shí)驗(yàn)室相關(guān)機(jī)構(gòu)創(chuàng)造了業(yè)務(wù)優(yōu)勢(shì)。
作為一系列分離科學(xué)、實(shí)驗(yàn)室信息管理、質(zhì)譜分析和熱分析技術(shù)的開創(chuàng)者，沃特世技術(shù)的重大突破和實(shí)驗(yàn)室解決方案為客戶的成功創(chuàng)造了持久的平臺(tái)。
2010年沃特世擁有16.4億美元的收入和5,400名員工，它將繼續(xù)帶領(lǐng)全世界的客戶探索科學(xué)并取得卓越成就。
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